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Id2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400550-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 ID2 基因编码 DNA 结合抑制因子 2(Id2),这是一种躺旋-环-螺旋(HLH)蛋白,缺乏 DNA 结合结构域,其主要功能是通过“捕获”E 蛋白来发挥作用,从而抑制谱系特异性的转录程序。通过调控由 bHLH 驱动的基因网络,Id2 在多种组织中调节细胞周期进程、分化以及维持类似祖细胞的状态,并整合来自 TGF-β/BMP、Notch 等通路的信号。ID2 表达异常与多种肿瘤及免疫相关情境中观察到的分化与增殖失衡表型有关,因此常被视为转录与表观遗传调控中的重要研究节点。研究人员常通过研究 ID2 来理解转录因子拮抗作用如何塑造细胞命运决定、应激反应与发育程序。
Id2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ID2 表达。
Id2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ID2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Id2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ID2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。