非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HuC 抗体 (D-6) Alexa Fluor® 488: sc-515624 AF488. 神经-2A 全细胞裂解液 (A) 和人脑组织提取物 (B) 中 HuC 表达的直接荧光西部印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂阻断: sc-516214.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HuC双切口酶质粒(h): sc-400172-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HuC 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HuC双切酶质粒（h）和HuC双切酶质粒（h2）编码针对ELAVL3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HuC: sc-515624，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HuC双切口酶质粒(h) | sc-400172-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HuC双切口酶质粒(h2) | sc-400172-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELAVL3（HuC）是一种在神经元中富集的RNA结合蛋白，能够识别靶标转录本中的AU富集元件，并通过调控mRNA的稳定性、定位与翻译来调节转录后基因表达。它通过塑造与突触功能和细胞骨架动态相关的RNA调控网络，促进神经元的分化与维持；同时也与更广泛的RNA加工通路相互衔接，包括可变剪接以及应激相关RNA颗粒的生物学过程。在神经发育与神经退行性疾病机制研究中，神经元RNA结合蛋白活性变化及其下游转录组程序常被重点关注，而ELAVL3既是神经元标记物，也是神经元特异性基因调控中的一个功能节点。关于人ELAVL3的研究通常探讨HuC依赖的RNA调控如何影响神经元成熟、兴奋性以及在细胞应激条件下的易损性。
HuC 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ELAVL3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ELAVL3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ELAVL3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ELAVL3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。