HuB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400169-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HuBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HuB (h) e o Plasmídeo Double Nickase HuB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ELAVL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HuB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400169-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HuB Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400169-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELAVL2 (HuB) é uma proteína ligante de RNA enriquecida em neurônios, da família Hu/ELAV, que reconhece elementos ricos em AU em transcritos-alvo para regular a estabilidade do mRNA, o splicing alternativo e a tradução. Ao moldar programas de expressão gênica pós-transcricional, a HuB influencia a diferenciação neuronal, a orientação axonal, a função sináptica e a plasticidade dependente de atividade, interagindo com vias que controlam o processamento de RNA e a tradução local. A desregulação da expressão ou da função de ELAVL2 tem sido associada a alterações em redes gênicas neuronais observadas em contextos neurodesenvolvimentais e neurodegenerativos, tornando-a relevante para o estudo de mecanismos que conectam o metabolismo de RNA ao fenótipo neuronal. A modulação experimental de HuB oferece uma forma de investigar como proteínas ligantes de RNA coordenam a dinâmica do transcriptoma em modelos neurais humanos.
HuB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ELAVL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ELAVL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ELAVL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ELAVL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.