Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSPA5/BiP/GRP78 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420699-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSPA5/BiP/GRP78O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSPA5/BiP/GRP78 (m) e o Plasmídeo Double Nickase HSPA5/BiP/GRP78 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hspa5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSPA5/BiP/GRP78 Anticorpo (76-E6): sc-13539
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSPA5/BiP/GRP78 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420699-NIC | 20 µg | $410.00 |
Hspa5 codifica a chaperona residente do RE HSPA5/BiP/GRP78, um regulador central do controle de qualidade do dobramento de proteínas e da proteostase em células de camundongo. A HSPA5 liga-se a polipeptídeos recém-sintetizados ou mal dobrados e coordena a resposta a proteínas mal dobradas (UPR) por meio de interações que modulam sensores de estresse do RE, como PERK, IRE1 e ATF6. Ao influenciar a degradação associada ao RE (ERAD), a homeostase de Ca²⁺ e o fluxo da via secretória, ela ajuda a determinar se as células se adaptam ao estresse ou entram em apoptose. A atividade desregulada de HSPA5 é frequentemente estudada em contextos de estresse metabólico, neurodegeneração e sinalização oncogênica, nos quais o estresse crônico do RE e a proteostase alterada contribuem para fenótipos relevantes de doença.
HSPA5/BiP/GRP78 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hspa5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hspa5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hspa5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hspa5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.