HS6ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407513

Visão geral

O HS6ST2 codifica a heparan sulfato 6-O-sulfotransferase 2, uma enzima residente no Golgi que catalisa a 6-O-sulfatação de resíduos de glicosamina durante a biossíntese de proteoglicanos de heparan sulfato. Essa modificação molda os padrões de sulfatação do heparan sulfato que regulam a ligação de ligantes e funções de co-receptores, influenciando vias de sinalização como FGF, VEGF, WNT, BMP e sinais mediados por quimiocinas. Ao ajustar as interações de glicosaminoglicanos da matriz extracelular e da superfície celular, o HS6ST2 contribui para a adesão celular, migração e o estabelecimento de padrões no desenvolvimento. Alterações na sulfatação do heparan sulfato têm sido associadas à desregulação da sinalização por fatores de crescimento e à remodelação do microambiente tumoral, o que sustenta a investigação do HS6ST2 na biologia do câncer e em outros distúrbios ligados à sinalização dependente da matriz extracelular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HS6ST2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HS6ST2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HS6ST2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HS6ST2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HS6ST2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HS6ST2 para a investigação da sinalização de HS6ST2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HS6ST2 críticos para a função HS6ST2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HS6ST2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HS6ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HS6ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HS6ST2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HS6ST2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HS6ST2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HS6ST2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HS6ST2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.