非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HP1β (MAC353): sc-56704. A-431 (A), HeLa (B) 和 Hep G2 (C) 核提取物以及 C6 (D) 和 HeLa (E) 全细胞裂解液中 HP1β 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HP1β CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403235
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HP1β CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在HP1β基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HP1β: sc-517288，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HP1β CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403235 | 20 µg | $397.00 |
概述
CBX1 编码异染色质蛋白 1β（HP1β），这是一种保守的染色质适配蛋白，可通过其染色质结构域识别 H3K9me2/3，并通过与 SUV39H 组蛋白甲基转移酶及其他抑制因子的相互作用促进染色质压缩。HP1β 通过协调更高阶的染色质结构，参与异染色质形成、转录沉默、DNA 复制时序以及基因组稳定性的维持。它还通过调节受损位点的可及性并影响修复因子的募集，参与 DNA 损伤应答以及修复通路选择。HP1β 相关表观遗传程序的失调，与多种癌症及神经发育研究背景中观察到的分化状态改变和基因组不稳定性有关。
HP1β CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CBX1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CBX1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CBX1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使HP1β蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CBX1缺失的细胞模型，用于HP1β信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 HP1β 功能至关重要的 CBX1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CBX1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 HP1β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 HP1β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CBX1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 HP1β HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 HP1β HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CBX1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CBX1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。