HoxD12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407472

Visão geral

HOXD12 codifica o fator de transcrição homeobox HoxD12, um membro do agrupamento HOXD que ajuda a estabelecer a identidade posicional durante o desenvolvimento embrionário e coordena a padronização dos membros e do esqueleto axial. Como regulador de ligação ao DNA, o HoxD12 integra-se a redes regulatórias HOX mais amplas e ao controle em nível de cromatina para moldar programas transcricionais específicos de tecido que governam a diferenciação e a morfogênese. A expressão desregulada de HOXD12 ou perturbações na regulação do agrupamento HOX têm sido associadas a anomalias do desenvolvimento e foram relatadas em assinaturas transcricionais em diversos tipos de câncer, refletindo seu papel no controle de redes gênicas relacionadas à linhagem e ao crescimento. Em contextos adultos e de doença, alterações na atividade de HOXD12 podem influenciar transições de estado celular, programas de migração e a reativação de vias de desenvolvimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HoxD12 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HOXD12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HOXD12, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HOXD12 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HoxD12.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HOXD12 para a investigação da sinalização de HoxD12, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HOXD12 críticos para a função HoxD12
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HOXD12 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HoxD12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HoxD12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HOXD12. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HoxD12 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HoxD12 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HOXD12 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HOXD12 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.