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HoxB9双切口酶质粒(h) | sc-401770-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxB9双切口酶质粒(h2) | sc-401770-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB9 编码同源盒转录因子 HoxB9,这是一种具有 DNA 结合能力的调控蛋白,在胚胎发生过程中参与建立前后轴(anterior–posterior)模式并决定组织身份。在人类细胞中,HoxB9 通过调控与形态发生、细胞周期控制以及上皮–间质可塑性相关的转录网络,影响细胞谱系决定与分化程序。HOXB9 表达失调与多种肿瘤背景下的致癌性转录状态有关,例如对血管生成和侵袭相关基因特征的影响;同时,它也用于研究因模式形成改变而导致的发育障碍。作为同源盒基因调控回路中的一个节点,HoxB9 对解析发育基因网络以及细胞命运的转录调控具有重要意义。
HoxB9 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HOXB9 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HOXB9内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HOXB9的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HOXB9基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。