Plásmido Doble Nickase (h) HoxB2: sc-404533-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxB2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxB2 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxB2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXB2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxB2 | sc-404533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxB2 | sc-404533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB2 codifica el factor de transcripción homeobox HoxB2, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que establece el patrón del eje anteroposterior durante la embriogénesis y respalda programas de segmentación y diferenciación en el rombencéfalo en desarrollo y en tejidos derivados de la cresta neural. Como parte de las redes reguladoras de genes HOX, HoxB2 coordina programas transcripcionales que controlan la especificación de linaje, el mantenimiento de la identidad celular y vías del desarrollo sensibles a morfógenos, incluido el patrón dependiente del ácido retinoico. Se ha informado de una expresión desregulada de HOXB2 en múltiples tipos de tumores y se estudia por sus posibles funciones en estados de diferenciación aberrantes, comportamiento invasivo y reprogramación transcripcional en modelos de cáncer. En sistemas celulares humanos, la alteración de HOXB2 se utiliza comúnmente para investigar circuitos reguladores génicos del desarrollo y cambios en el destino celular relevantes para enfermedades.
HoxB2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXB2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXB2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXB2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXB2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.