HoxA10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420900

概要

Hoxa10は、ホメオボックス転写因子HoxA10をコードしており、胚の前後軸をパターン化し、発生中の泌尿生殖器および生殖器系で領域特異的なアイデンティティを規定する、DNA結合性の調節因子である。マウスでは、HoxA10は細胞運命決定、分化、形態形成を制御する転写プログラムを協調させることで発生における遺伝子制御ネットワークに寄与し、増殖や組織リモデリングに対しては文脈依存的な影響を及ぼす。その活性は、より広範なHOX/TALE共因子やクロマチン制御と連動して、体節（セグメント）特異的な転写状態の確立に関与する。HOXA10発現の異常は、造血分化の変化や白血病化に関わる転写プログラムと関連づけられており、発生異常やがんに関連した系譜（ライン）規定を扱うモデルにおける機構的ハブとしての有用性を支持している。

HoxA10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるHoxa10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Hoxa10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Hoxa10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HoxA10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HoxA10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Hoxa10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HoxA10の機能に不可欠なHoxa10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Hoxa10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HoxA10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびHoxA10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Hoxa10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HoxA10 HDRプラスミド（m）および HoxA10 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHoxa10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHoxa10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。