HMG-20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407302
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HMG-20A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HMG-20A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HMG-20A Anticorpo (D-5): sc-393028
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HMG-20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407302 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HMG20A codifica a HMG-20A, um fator associado à cromatina do tipo “high mobility group” que contribui para a regulação transcricional ao influenciar a organização dos nucleossomos e o acesso de complexos regulatórios ao DNA. Tem sido implicada no controlo epigenético de programas de linhagem, incluindo a expressão génica no neurodesenvolvimento, através de interações com maquinaria de remodelação da cromatina e de modificação de histonas. Ao moldar a atividade de promotores e enhancers, a HMG-20A pode afetar o controlo do ciclo celular, a diferenciação e a manutenção da identidade celular. A regulação alterada de estados de cromatina associados à HMG20A é relevante para estudos de fenótipos neurológicos e de desregulação transcricional associada ao cancro.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HMG-20A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HMG20A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HMG20A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HMG20A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HMG-20A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HMG20A para a investigação da sinalização de HMG-20A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HMG20A críticos para a função HMG-20A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HMG20A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HMG-20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HMG-20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HMG20A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HMG-20A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HMG-20A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HMG20A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HMG20A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.