Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HMG-1/HMGB1 Antibody (D-3): sc-518191. Western blot analysis of HMG-1 expression in non-transfected 293: sc-110760 (A), human HMG-1 transfected 293: sc-110487 (B), Jurkat (C), HeLa (D), NIH/3T3 (E) and PC-12 (F) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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HMG-1/HMGB1双切口酶质粒(h): sc-400735-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HMG-1/HMGB1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HMG-1/HMGB1双切酶质粒（h）和HMG-1/HMGB1双切酶质粒（h2）编码针对HMGB1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HMG-1/HMGB1: sc-518191，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HMG-1/HMGB1双切口酶质粒(h) | sc-400735-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HMG-1/HMGB1双切口酶质粒(h2) | sc-400735-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HMGB1（HMG-1）编码一种高度保守的染色质相关 DNA 结合蛋白，能够使 DNA 弯曲并组织核蛋白复合体，从而影响转录、复制、重组以及 DNA 修复。在细胞核内，HMGB1 参与包括碱基切除修复和 DNA 双链断裂应答在内的基因组稳定性通路；而当其被释放到细胞外时，可作为损伤相关分子模式（DAMP），调控先天免疫信号。通过与 RAGE、TLR 等受体相互作用，HMGB1 将细胞应激与炎症程序连接起来，从而塑造肿瘤微环境并影响组织损伤应答。HMGB1 活性与定位的失调与肿瘤生物学、自身免疫及炎症性病理相关，因此常被用作研究染色质动力学与免疫代谢机制的关键枢纽。
HMG-1/HMGB1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HMGB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HMGB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HMGB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HMGB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。