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HLA-E慢病毒激活颗粒(m) | sc-437133-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 H2-T-ps 编码非经典 MHC I 类分子 HLA-E。HLA-E 是一种保守的抗原呈递蛋白,主要呈递来源于引导序列(leader sequence)的肽段,从而调控先天与适应性免疫。HLA-E 可与 NK 细胞及部分 T 细胞亚群上的抑制性与激活性受体结合,进而塑造免疫监视、细胞毒性“许可”(licensing)以及组织内的免疫耐受。其表达水平与所呈递肽谱整合了抗原加工与 MHC I 类装配通路的信号,影响免疫突触处的相互作用。HLA-E 介导的信号失衡已在病毒免疫逃逸、肿瘤免疫编辑、移植生物学以及炎症性疾病模型等研究背景中得到探讨。
HLA-E 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 H2-T-ps 表达。
HLA-E 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在H2-T-ps转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HLA-E表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 H2-T-ps 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。