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HLA-E慢病毒激活颗粒(h) | sc-403124-LAC | 200 µl | $455.00 |
HLA-E 编码一种非经典的 MHC I 类分子,可呈递受限的肽谱,包括来自其他 HLA I 类蛋白的信号肽(leader sequence peptides),从而调控免疫监视。HLA-E 通过与自然杀伤(NK)细胞及部分 T 细胞上的抑制性与激活性受体(如 NKG2A/CD94 和 NKG2C/CD94)结合,在细胞表面调节细胞毒性、细胞因子产生以及免疫耐受。其表达水平与肽装载过程与抗原加工与呈递通路相关,涉及内质网中的 TAP 以及肽装载复合体。HLA-E 的丰度或肽呈递异常失调常在感染、炎症、肿瘤免疫逃逸及移植免疫生物学等背景下被研究,因为 NK 细胞检查点信号会塑造免疫结局。
HLA-E 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 HLA-E 表达。
HLA-E 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在HLA-E转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HLA-E表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 HLA-E 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。