HLA-ECRISPR激活质粒(m): sc-437133-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HLA-E CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- HLA-E CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 HLA-E CRISPR 激活质粒 (m) 和 HLA-E CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 H2-T-ps 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HLA-ECRISPR激活质粒(m) | sc-437133-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
HLA-ECRISPR激活质粒(m2) | sc-437133-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
H2-T-ps 编码一种小鼠 MHC I 类 Ib 分子，在功能上类似于 HLA-E，专门负责呈递受限的肽库，从而调控先天与适应性免疫监视。通过与 NK 细胞及部分 T 细胞表面的 CD94/NKG2 受体结合，HLA-E 样分子有助于调节细胞毒性活化阈值，将内质网（ER）中的抗原加工与类似免疫检查点的信号传导联系起来。该轴还与由干扰素驱动的通路相整合，这些通路会调控抗原呈递与细胞应激反应，从而在炎症过程中影响组织稳态。非经典 MHC I 的表达或肽装载发生失调，可能改变 NK 细胞教育过程以及肿瘤—免疫相互作用，因此该基因与小鼠模型中的感染、自身免疫以及肿瘤免疫生物学研究密切相关。
HLA-E CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性H2-T-ps的表达。
HLA-E CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的H2-T-ps基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于H2-T-ps转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性HLA-E表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的H2-T-ps位点，并能够研究内源性位点上依赖于HLA-E的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在H2-T-ps表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟HLA-E通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。