HLA-DRβ5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402985-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HLA-DRβ5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HLA-DRβ5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HLA-DRβ5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HLA-DRB5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HLA-DRβ5 Anticorpo (4D12): sc-53889
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HLA-DRβ5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402985-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HLA-DRβ5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402985-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLA-DRB5 codifica a cadeia β5 do HLA-DR, um componente polimórfico de heterodímeros do MHC de classe II que apresentam peptídeos derivados do meio extracelular a células T CD4+. Ao se associar ao HLA-DRA em células apresentadoras de antígeno, o HLA-DRβ5 contribui para o carregamento de peptídeos em endossomos, a formação da sinapse imunológica e programas subsequentes de ativação de células T que moldam as respostas imunes adaptativas. A variação nos sulcos de ligação a peptídeos do MHC de classe II influencia o repertório de antígenos e a tolerância imunológica, relacionando os loci HLA-DR à suscetibilidade e à estratificação em múltiplos contextos de doenças inflamatórias e imunomediadas. Assim, o HLA-DRB5 é amplamente estudado na biologia da apresentação de antígenos, no mapeamento de haplótipos de HLA e nos mecanismos que regulam a comunicação entre APCs e células T.
HLA-DRβ5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HLA-DRB5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HLA-DRB5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HLA-DRB5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HLA-DRB5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.