HLA-DP β1CRISPR激活质粒(h): sc-401413-ACT

HLA-DPB1 编码 HLA-DP 的 β1 链，是 MHC II 类异源二聚体的核心组成部分，负责将来源于细胞外的肽段呈递给 CD4+ T 细胞，并塑造适应性免疫的识别过程。其表达主要集中于专业抗原呈递细胞，并受细胞因子驱动的调控程序控制，包括对干扰素-γ（IFN-γ）响应的转录调控，从而支持抗原加工与呈递通路以及 T 细胞启动。HLA-DPB1 等位基因的变异会影响肽结合谱与免疫反应性，使该位点与自身免疫和炎症性疾病、感染性疾病反应以及移植相关同种异体反应的差异性易感性与结局相关联。作为 HLA II 类区域的一部分，HLA-DP β1 也是解析抗原呈递机制与人类免疫遗传学关联的重要标记。

HLA-DP β1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HLA-DPB1的表达。

HLA-DP β1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的HLA-DPB1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于HLA-DPB1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性HLA-DP β1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的HLA-DPB1位点，并能够研究内源性位点上依赖于HLA-DP β1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HLA-DPB1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟HLA-DP β1通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。