Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HLA-DMβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406436
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HLA-DMβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HLA-DMβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HLA-DMβ Anticorpo (E-8): sc-393548
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HLA-DMβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406436 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HLA-DMB codifica a cadeia beta do HLA-DM, uma molécula não clássica do MHC de classe II que catalisa o carregamento de peptídeos em HLA-DR, -DP e -DQ ao promover a liberação de CLIP e estabilizar complexos peptídeo–MHC II de alta afinidade em compartimentos endossomais tardios. Essa etapa de edição é central para as vias de processamento e apresentação de antígenos que moldam a priming de linfócitos T CD4+, a seleção tímica e a tolerância imune periférica. Alterações na função do HLA-DM podem modificar o imunopetidoma e influenciar programas de sinalização inflamatória ligados à autoimunidade e à desregulação imunológica. Por isso, o HLA-DMB é amplamente estudado no contexto de redes de expressão de HLA de classe II, da apresentação de antígenos responsiva ao interferon e de haplótipos de HLA associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HLA-DMβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HLA-DMB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HLA-DMB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HLA-DMB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HLA-DMβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HLA-DMB para a investigação da sinalização de HLA-DMβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HLA-DMB críticos para a função HLA-DMβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HLA-DMB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HLA-DMβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HLA-DMβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HLA-DMB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HLA-DMβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HLA-DMβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HLA-DMB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HLA-DMB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.