Date published: 2026-7-10

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HLA-B双切口酶质粒(h): sc-400627-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • HLA-B 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • HLA-B双切酶质粒(h)和HLA-B双切酶质粒(h2)编码针对HLA-B的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:HLA class I: sc-59206,通过WB, IF或者IHC分析
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    HLA-B双切口酶质粒(h)

    sc-400627-NIC
    20 µg
    $410.00

    HLA-B双切口酶质粒(h2)

    sc-400627-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    HLA-B 编码一种经典的 MHC I 类分子重链,可与 β2-微球蛋白组装,将内源性肽抗原呈递给 CD8⁺ T 细胞。这一抗原呈递轴塑造免疫监视,影响胸腺选择与外周耐受,并与干扰素信号以及涉及 TAP 和免疫蛋白酶体组分的抗原加工通路相互衔接。HLA-B 的多态性和表达改变与抗病毒及肿瘤免疫识别的差异相关,并与多种免疫介导性疾病有关,包括强直性脊柱炎和药物超敏反应。由于 HLA-B 高度多态且在免疫肽组(immunopeptidome)组成中居于核心地位,它常被用于移植配型、感染生物学和肿瘤免疫学模型研究。

    HLA-B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HLA-B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HLA-B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HLA-B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HLA-B基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。