Plasmide Double Nickase (m) Histone H2A.Z: sc-424549-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Histone H2A.Z correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Histone H2A.Z Double Nickase (m) et le plasmide Histone H2A.Z Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant H2afz. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Histone H2A.Z | sc-424549-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Histone H2A.Z | sc-424549-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
H2afz code la variante d’histone H2A.Z, un composant central de la chromatine qui remplace l’histone H2A canonique au sein des nucléosomes afin de moduler l’accessibilité de la chromatine et la réactivité transcriptionnelle. H2A.Z participe à la régulation des promoteurs et des enhancers, à la fonction des éléments isolateurs (boundary elements) et au couplage de l’état de la chromatine à des processus tels que la réplication de l’ADN, la signalisation des dommages à l’ADN et la progression du cycle cellulaire. Par ses effets sur la stabilité des nucléosomes et le recrutement de remodeleurs de la chromatine, H2A.Z influence la spécification des lignages et les programmes géniques induits par le stress. Une dérégulation du dépôt ou du renouvellement de H2A.Z a été associée à des paysages épigénétiques altérés observés en cancérologie ainsi qu’à des phénotypes inflammatoires ou développementaux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du contrôle transcriptionnel.
Histone H2A.Z Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus H2afz dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de H2afz. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de H2afz. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de H2afz.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.