Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Histone H10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420754
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Histone H10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Histone H10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Histone H10 Anticorpo (34): sc-56695
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Histone H10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420754 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene H1f0 de camundongo codifica a histona H1⁰, uma histona ligadora associada à diferenciação que se liga ao DNA nucleossômico para estabilizar a compactação da cromatina em níveis superiores e influenciar a acessibilidade do genoma. Ao modular o espaçamento entre nucleossomos e a dinâmica da cromatina, a H1⁰ contribui para o controle epigenético de programas transcricionais durante a saída do ciclo celular, o comprometimento de linhagem e a senescência celular. Alterações na abundância ou na distribuição da H1⁰ têm sido associadas a mudanças no estado da cromatina, na estabilidade genômica e à regulação transcricional aberrante observada na biologia do câncer e em outros distúrbios que envolvem diferenciação comprometida. Como proteína arquitetônica da cromatina, a H1⁰ é frequentemente estudada em vias que governam a organização da heterocromatina, as respostas a danos no DNA e a regulação gênica de longo alcance.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Histone H10 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene H1f0 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do H1f0, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do H1f0 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Histone H10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de H1f0 para a investigação da sinalização de Histone H10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) H1f0 críticos para a função Histone H10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos H1f0 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Histone H10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Histone H10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus H1f0. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Histone H10 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Histone H10 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia H1f0 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo H1f0 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.