Plásmido Doble Nickase (h) Histone cluster 1 H1D: sc-408739-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histone cluster 1 H1D consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histone cluster 1 H1D (h) y el plásmido de doble nickasa Histone cluster 1 H1D (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HIST1H1D. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histone cluster 1 H1D | sc-408739-NIC | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1D codifica la histona del clúster 1 H1D, una histona de enlace que se une al ADN nucleosomal en los sitios de entrada y salida para promover una compactación de orden superior de la cromatina y regular la accesibilidad del genoma. Al modular el espaciado de los nucleosomas y la organización de la fibra de cromatina, H1D influye en los programas de transcripción, el momento de la replicación del ADN y la eficiencia de la señalización y reparación del daño en el ADN. Las alteraciones en la abundancia o la distribución de la histona H1 se asocian con desregulación epigenética, inestabilidad genómica y estados de diferenciación aberrantes observados en diversos modelos de cáncer y de biología del desarrollo. Como parte del clúster de histonas, HIST1H1D también es relevante para estudiar el ensamblaje de la cromatina acoplado a la replicación y la remodelación de la cromatina vinculada al ciclo celular.
Histone cluster 1 H1D El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HIST1H1D en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HIST1H1D. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HIST1H1D. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HIST1H1D alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.