Histamine H4 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402430

概要

HRH4は、ヒスタミンH4受容体（H4R）をコードするGi/o共役型GPCRであり、主に造血系および免疫細胞コンパートメントで発現しています。H4Rはヒスタミンを感知し、走化性、サイトカイン放出、カルシウム依存性シグナル伝達を調節します。受容体が活性化されるとアデニル酸シクラーゼ活性が抑制され、cAMPレベルが調節されるほか、MAPKやPI3K関連のシグナルネットワークとも連動して、白血球の遊走や炎症の度合い（炎症トーン）を形作ります。HRH4の活性は免疫細胞のトラフィッキングやバリア関連炎症に関与し、ヒスタミン作動性シグナルをアレルギー性・炎症性プロセスと結び付けています。H4Rシグナルの破綻（異常）は、喘息、皮膚炎、そう痒症、さらに広範な免疫介在性病態などで研究されており、受容体依存的なケモカイン応答や白血球リクルートメントの変化がしばしば評価されています。

Histamine H4 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHRH4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HRH4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HRH4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Histamine H4 Receptorタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Histamine H4 Receptorシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HRH4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Histamine H4 Receptorの機能に不可欠なHRH4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HRH4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Histamine H4 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHistamine H4 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HRH4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Histamine H4 Receptor HDRプラスミド（h）および Histamine H4 Receptor HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHRH4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHRH4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。