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Histamine H3 Receptor双切口酶质粒(h) | sc-402473-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH3 编码组胺 H3 受体,这是一种与 Gi/o 蛋白偶联的 GPCR,在中枢神经系统中高度富集,主要作为突触前自受体与异受体发挥作用,以调控神经递质释放。组胺结合后,HRH3 信号可抑制腺苷酸环化酶,从而降低 cAMP/PKA 活性,并调节离子通道电导及下游 MAPK/ERK 通路,进而影响神经元兴奋性与突触可塑性。通过对组胺能张力的控制以及与多巴胺能、胆碱能和去甲肾上腺素能环路的串话,HRH3 参与睡眠—觉醒调节、认知及与食欲相关的神经生物学过程。HRH3 表达或信号传导的异常已在神经系统与神经精神疾病机制研究中受到关注,支持其作为通路与环路层面研究靶点的价值。
Histamine H3 Receptor 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HRH3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HRH3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HRH3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HRH3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。