HIPK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406669

概要

ホメオドメイン相互作用タンパク質キナーゼ3（HIPK3）は、セリン／スレオニンキナーゼであり、転写調節因子をリン酸化することでストレスおよび発生由来のシグナルを統合し、細胞運命決定に関わる遺伝子発現プログラムを形成します。HIPK3は、ホメオボックスタンパク質やその他の核内因子との相互作用を介して、アポトーシスシグナル、DNA損傷応答、ならびにTGF-β/BMP関連の転写出力の調節に関与するとされています。これらの役割を通じてHIPK3は、増殖、分化、細胞のストレス耐性に影響を及ぼし、これらはがん生物学や組織リモデリングの文脈でしばしば攪乱される過程です。さらに、HIPK3の活性または発現の異常は、炎症シグナルや代謝恒常性の変化とも関連しており、経路中心の研究における機序的ハブとしての有用性を支持します。

HIPK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHIPK3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HIPK3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HIPK3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HIPK3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HIPK3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HIPK3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HIPK3の機能に不可欠なHIPK3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HIPK3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HIPK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHIPK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HIPK3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HIPK3 HDRプラスミド（h）および HIPK3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHIPK3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHIPK3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。