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HIPK2双切口酶质粒(h) | sc-402003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HIPK2双切口酶质粒(h2) | sc-402003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 HIPK2(homeodomain-interacting protein kinase 2, 与同源结构域相互作用的蛋白激酶2)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,可通过磷酸化包括 p53 在内的转录调控因子,并调节与染色质相关的复合物,从而整合应激与发育信号。它参与 DNA 损伤应答、细胞凋亡与细胞衰老程序,并通过与 ATM/ATR 信号通路、Wnt/β-连环蛋白调控以及 TGF-β 响应性基因表达相关的途径实现转录调控。HIPK2 还与泛素依赖的蛋白周转及核内小体动态相互作用,从而塑造情境依赖性的基因表达结局。HIPK2 活性与表达的失调与检查点控制改变、异常的存活信号以及肿瘤生物学相关,因此是研究基因组稳定性与应激适应性转录机制的重要节点。
HIPK2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HIPK2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HIPK2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HIPK2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HIPK2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。