Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HIF PHD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403334-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HIF PHD2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HIF PHD2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HIF PHD2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EGLN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HIF PHD2 Anticorpo (H-8): sc-271835
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HIF PHD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403334-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HIF PHD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403334-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EGLN1 codifica a prolil-hidroxilase 2 de HIF (PHD2), uma dioxigenase sensora de oxigênio que hidroxila subunidades HIF-α em uma reação dependente de ferro e 2-oxoglutarato. Em normóxia, essa modificação promove a ubiquitinação mediada por VHL e a degradação proteassomal de HIF-α, limitando assim programas transcricionais que controlam a angiogênese, o metabolismo glicolítico, a eritropoiese e a sobrevivência celular. A PHD2 integra sinais da disponibilidade de oxigênio, do metabolismo mitocondrial e de espécies reativas de oxigênio para modular a sinalização induzível por hipóxia. A atividade desregulada da via EGLN1/HIF tem sido associada a distúrbios da homeostase do oxigênio e contribui para fenótipos induzidos por hipóxia relevantes para a biologia do câncer, modelos de isquemia e microambientes inflamatórios.
HIF PHD2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EGLN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EGLN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EGLN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EGLN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.