Hex Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403827-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HexO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Hex (h) e o Plasmídeo Double Nickase Hex (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HHEX. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Hex Anticorpo (HHE5I261): sc-81284
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hex Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403827-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hex Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403827-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HHEX humano codifica Hex, um fator de transcrição homeobox que coordena a especificação de linhagens e a organogênese, com papéis proeminentes no padrão do endoderma e no desenvolvimento hematopoético inicial. Hex integra programas transcricionais dependentes do contexto que influenciam decisões de destino celular, proliferação e diferenciação por meio de redes regulatórias que se cruzam com vias de sinalização do desenvolvimento, como Wnt, BMP e TGF-β. Em tecidos maduros, o HHEX contribui para a biologia vascular e de células imunes, e a expressão desregulada tem sido associada a estados de diferenciação alterados e a circuitos transcricionais oncogênicos em diversas neoplasias. Como o HHEX funciona como um nó em redes regulatórias gênicas do desenvolvimento e da hematopoese, ele é frequentemente investigado para mapear o uso de enhancers, alvos transcricionais e estados de cromatina específicos do contexto.
Hex O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HHEX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HHEX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HHEX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HHEX interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.