Hex Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420852
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hex O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Hex, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hex Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420852 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hhex (Hex) é um fator de transcrição homeobox que regula o padrão embrionário inicial e a organogênese, com funções proeminentes na especificação do endoderma anterior e no desenvolvimento das linhagens de fígado, pâncreas e tireoide em camundongos. Ao se ligar ao DNA por meio de seu homeodomínio, Hex integra sinais do desenvolvimento para controlar programas de expressão gênica que influenciam decisões de destino celular, morfogênese e diferenciação tecidual. A atividade de Hhex interage com vias que governam o desenvolvimento endodérmico e vascular e tem sido associada à regulação de redes gênicas hematopoéticas e endoteliais. A expressão ou função desregulada de Hhex está associada a anomalias do desenvolvimento e tem sido implicada em estados de diferenciação alterados relevantes para a biologia do câncer e modelos de doenças hematológicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hex (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hhex em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hhex, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hhex na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hex.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hhex para a investigação da sinalização de Hex, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hhex críticos para a função Hex
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hhex para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Hex Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Hex Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hhex. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Hex Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Hex (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hhex para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hhex definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.