Heme Oxygenase 1/HMOX1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400157-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Heme Oxygenase 1/HMOX1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Heme Oxygenase 1/HMOX1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Heme Oxygenase 1/HMOX1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HMOX1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Heme Oxygenase 1/HMOX1 Anticorpo (A-3): sc-136960
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400157-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400157-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HMOX1 codifica a heme oxigenase 1 (HO-1), uma enzima induzível associada ao retículo endoplasmático (RE) que catalisa a degradação do heme em biliverdina, ferro livre e monóxido de carbono, conectando o turnover de heme à homeostase redox celular. A HO-1 é um efetor central da resposta ao estresse oxidativo e se integra à sinalização NRF2/KEAP1, a vias de manejo do ferro e a mediadores inflamatórios para modular a citoproteção, a função mitocondrial e decisões de destino celular. Alterações na regulação de HMOX1 têm sido associadas à desregulação da sinalização por espécies reativas de oxigênio (ROS), ao comprometimento do sequestro de ferro e a mudanças em respostas impulsionadas por citocinas. Esses processos são frequentemente investigados em contextos como biologia vascular, neuroinflamação, estresse metabólico e remodelamento do microambiente tumoral, nos quais o metabolismo do heme e o estresse oxidativo são variáveis-chave.
Heme Oxygenase 1/HMOX1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HMOX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HMOX1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HMOX1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HMOX1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.