Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HADHB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433034
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HADHB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HADHB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HADHB Anticorpo (E-1): sc-271495
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HADHB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433034 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Hadhb de camundongo codifica a subunidade beta da proteína mitocondrial trifuncional (HADHB), um complexo enzimático essencial que catalisa etapas-chave da β-oxidação de ácidos graxos de cadeia longa, incluindo as atividades de enoil-CoA hidratase e 3-hidroxiacil-CoA desidrogenase. Ao sustentar o metabolismo energético mitocondrial, a HADHB ajuda a manter a homeostase lipídica e influencia as respostas celulares à disponibilidade de nutrientes e ao estresse metabólico. A disrupção da oxidação mitocondrial de ácidos graxos pode desregular o equilíbrio redox e a produção de ATP, com efeitos downstream em tecidos com alta demanda oxidativa. Assim, alterações na função da HADHB são relevantes para estudos de disfunção mitocondrial e de patologias associadas a lipídios, incluindo fenótipos cardiometabólicos e neuromusculares modelados em camundongos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HADHB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hadhb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hadhb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hadhb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HADHB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hadhb para a investigação da sinalização de HADHB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hadhb críticos para a função HADHB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hadhb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HADHB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HADHB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hadhb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HADHB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HADHB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hadhb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hadhb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.