GULP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-406041-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- GULP as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- GULP As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo GULP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo GULP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor GULP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: GULP Anticorpo (E-4): sc-374591
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GULP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-406041-LAC | 200 µl | $455.00 |
GULP1 codifica a proteína adaptadora GULP, um fator que contém um domínio de ligação a fosfotirosina e que conecta receptores de engolfamento da superfície celular à sinalização intracelular durante a eferocitose e a fagocitose. A GULP atua a jusante de receptores como LRP1/MEGF10 e integra-se a programas de remodelação do citoesqueleto e de tráfego de membranas para promover a remoção de células apoptóticas e de detritos celulares. Por meio desses processos, a GULP influencia o tônus inflamatório e a homeostase tecidual ao moldar como fagócitos mieloides e fagócitos não profissionais resolvem a morte celular. A desregulação de vias de engolfamento e depuração envolvendo GULP1 tem sido investigada em contextos que incluem neuroinflamação, neurodegeneração e biologia do câncer, nos quais alterações na remoção de detritos podem afetar a sinalização no microambiente.
As Partículas de Ativação Lentivirais GULP (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de GULP1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais GULP (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição GULP1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de GULP. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo GULP1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.