GSTO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404107-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GSTO1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GSTO1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GSTO1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GSTO1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GSTO1 Anticorpo (21): sc-130317
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GSTO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSTO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A glutationa S-transferase ômega 1 (GSTO1) é uma enzima citosólica da classe ômega das GSTs que utiliza glutationa para catalisar reações de tioltransferase e de desglutationilação, influenciando o equilíbrio redox celular e o estado de S-glutationilação de proteínas. Por meio dessas atividades, a GSTO1 contribui para a desintoxicação e para a regulação de respostas ao estresse oxidativo, conectando-se ao metabolismo da glutationa e a vias mais amplas de sinalização controladas por mecanismos redox. Variações na expressão ou na atividade da GSTO1 têm sido associadas a alterações na suscetibilidade a dano oxidativo e na sinalização inflamatória, processos relevantes para neurodegeneração, biologia do câncer e contextos de estresse metabólico. Em células humanas, a função da GSTO1 é frequentemente estudada em relação ao processamento de eletrófilos reativos, à regulação redox-dependente de enzimas e a programas transcricionais adaptativos ao estresse.
GSTO1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GSTO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GSTO1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GSTO1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GSTO1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.