Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GSK-3α/β Antibody (0011-A): sc-7291. Near-infrared western blot analysis of GSK-3α/β expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human GSK-3α transfected: sc-114699 (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
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GSK-3α双切口酶质粒(h): sc-400518-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GSK-3α 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GSK-3α双切酶质粒（h）和GSK-3α双切酶质粒（h2）编码针对GSK3A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GSK-3α: sc-5264，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GSK-3α双切口酶质粒(h) | sc-400518-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSK-3α双切口酶质粒(h2) | sc-400518-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GSK3A 编码糖原合成酶激酶-3α（GSK-3α），这是一种持续处于活化状态的丝氨酸/苏氨酸激酶，能够整合来自 Wnt/β-连环蛋白、PI3K–AKT 以及胰岛素通路的信号，从而调控糖原代谢、细胞周期进程与细胞凋亡。GSK-3α 通过磷酸化 β-连环蛋白等底物以及多种转录调控因子，影响控制分化与细胞应激反应的基因表达程序。在多种与疾病相关的情境中，GSK-3α 活性及其下游信号的失调与增殖改变、代谢稳态紊乱和炎症信号异常有关。作为 GSK3B 的旁系同源基因，研究中常对 GSK3A 进行分析，以厘清信号网络中各同工型的特异功能及其代偿机制。
GSK-3α 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GSK3A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GSK3A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GSK3A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GSK3A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。