GPRC5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409271

Visão geral

GPRC5B (receptor acoplado à proteína G da classe C, grupo 5, membro B) é uma proteína de membrana do tipo GPCR órfã, implicada na integração de sinais na superfície celular, com funções descritas na regulação das saídas das vias MAPK/ERK e PI3K-AKT, no tráfego de receptores e em respostas transcricionais a estímulos extracelulares. É expressa em múltiplos tecidos e tem sido associada ao controle da proliferação celular, diferenciação e sinalização metabólica, incluindo processos responsivos à insulina em contextos de tecido adiposo e músculo. A alteração da expressão de GPRC5B tem sido relacionada à sinalização inflamatória e a fenótipos oncogênicos em diversos sistemas modelo, sugerindo relevância para estudos de biologia tumoral, mecanismos de doenças metabólicas e vias relacionadas ao sistema imune. Como regulador associado à membrana, é frequentemente investigada pelo seu impacto no cross-talk entre receptores, na dinâmica de sinalização celular e em programas adaptativos ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPRC5B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GPRC5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GPRC5B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GPRC5B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPRC5B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GPRC5B para a investigação da sinalização de GPRC5B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GPRC5B críticos para a função GPRC5B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GPRC5B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GPRC5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPRC5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GPRC5B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GPRC5B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPRC5B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GPRC5B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GPRC5B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.