GPR39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427882
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR39 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPR39, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427882 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Gpr39 codifica o GPR39, um receptor acoplado à proteína G sensível ao zinco, implicado na regulação de cascatas de sinalização intracelular que moldam a sobrevivência celular, a secreção e o tônus inflamatório. Em sistemas murinos, a atividade do GPR39 tem sido associada à modulação de vias dependentes de AMPc e de Ca2+ e à sinalização de quinases a jusante, influenciando a função de barreira epitelial, a sinalização neuronal e a homeostase metabólica. Alterações na sinalização do GPR39 têm sido estudadas em contextos como disfunção metabólica, inflamação gastrointestinal e fenótipos neurocomportamentais, tornando-o um nó útil para a investigação de vias. Como receptor de membrana que integra sinais extracelulares com saídas transcricionais e metabólicas, o GPR39 oferece um alvo acessível para dissecar redes dirigidas por GPCR in vivo e em células em cultura.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR39 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gpr39 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gpr39, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gpr39 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR39.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gpr39 para a investigação da sinalização de GPR39, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gpr39 críticos para a função GPR39
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gpr39 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPR39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GPR39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gpr39. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR39 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GPR39 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gpr39 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gpr39 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.