GPR22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428483

Visão geral

Gpr22 codifica o GPR22, um recetor órfão acoplado à proteína G (GPCR) estudado sobretudo na biologia cardíaca e vascular, onde tem sido associado à regulação de vias de sinalização ativadas por stress e de programas de remodelação celular. Embora o seu ligando endógeno permaneça desconhecido, o acoplamento típico de GPCR sugere uma possível influência em vias de segundos mensageiros, como a sinalização cAMP/PKA e MAPK, que moldam respostas transcricionais, o metabolismo e a função contrátil. Em modelos de ratinho e em estudos de expressão, o GPR22 tem sido associado a fenótipos cardiovasculares, incluindo hipertrofia cardíaca e remodelação relacionada com insuficiência cardíaca, o que motiva a investigação do seu papel na homeostase de cardiomiócitos e de células vasculares. O Gpr22 também é utilizado como marcador em perfis transcricionais específicos de tecido para relacionar estados de sinalização de GPCR com redes génicas relevantes para a doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR22 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gpr22 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gpr22, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gpr22 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR22.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gpr22 para a investigação da sinalização de GPR22, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gpr22 críticos para a função GPR22
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gpr22 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GPR22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GPR22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gpr22. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR22 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GPR22 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gpr22 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gpr22 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.