GPR142 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415656
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GPR142 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GPR142, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GPR142 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-415656 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
GPR142 codifica el receptor 142 acoplado a proteína G, un GPCR huérfano/de clase A enriquecido en tejidos metabólicamente relevantes y vinculado al reconocimiento de nutrientes. Tras su activación, GPR142 se acopla a proteínas G heterotriméricas para regular la señalización de segundos mensajeros y vías dependientes de calcio que influyen en la secreción hormonal y en una homeostasis metabólica más amplia. Estudios transcripcionales y genéticos han asociado GPR142 con fenotipos endocrinos y metabólicos, incluidas rutas relevantes para la regulación de la glucosa y la función de los islotes pancreáticos. Como receptor de superficie celular, constituye un punto de intervención accesible para estudiar la señalización de GPCR, el descubrimiento de ligandos y los programas transcripcionales impulsados por el receptor.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR142 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPR142 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPR142 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPR142 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR142.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPR142 para la investigación de la señalización de GPR142, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GPR142 críticos para la función de GPR142
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPR142 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GPR142 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPR142 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPR142. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR142 (h) y el plásmido HDR GPR142 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPR142 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPR142 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.