Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GPR14 Antibody (D-4): sc-514460. Western blot analysis of GPR14 expression in human heart tissue extract.
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GPR14双切口酶质粒(h): sc-402393-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GPR14 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GPR14双切酶质粒（h）和GPR14双切酶质粒（h2）编码针对UTS2R的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GPR14: sc-514460，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GPR14双切口酶质粒(h) | sc-402393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR14双切口酶质粒(h2) | sc-402393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UTS2R 编码 G 蛋白偶联受体 GPR14，它是神经肽尿张素 II（urotensin II）的高亲和力受体，可调控血管张力、平滑肌收缩以及神经内分泌信号传导。配体结合后，GPR14 主要与 Gαq/11 偶联，激活磷脂酶 C，引发细胞内 Ca²⁺ 动员，并启动下游 MAPK/ERK 信号，同时还会通过依赖 RhoA/ROCK 的机制影响细胞骨架重塑。这些通路使 UTS2R 与内皮细胞和心肌细胞功能调节、炎症信号以及细胞增殖程序的调控相关。尿张素 II–UTS2R 信号的异常改变已与心血管及代谢性疾病的生物学过程相关，因此支持在相关的人源细胞模型中开展机制研究。
GPR14 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 UTS2R 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对UTS2R内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏UTS2R的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了UTS2R基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。