CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
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GPR120 Double Nickaseプラスミド (r): sc-437300-NIC
- 対象生物種: rat
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- GPR120 Double Nickaseプラスミド (r)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- GPR120ダブルニカースプラスミド（r）およびGPR120ダブルニカースプラスミド（r2）は、を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
GPR120 Double Nickaseプラスミド (r) | sc-437300-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR120 Double Nickaseプラスミド (r2) | sc-437300-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR120（FFAR4）は長鎖不飽和脂肪酸をリガンドとするGタンパク質共役型受容体（GPCR）であり、Gαq/11依存性およびβアレスチン依存性の経路を介して、脂質の感知を細胞内シグナル伝達へと結び付けます。ラット細胞では、GPR120の活性化によりカルシウムフラックス、MAPKシグナル、抗炎症プログラムが調節され、脂肪細胞分化、インスリン感受性、マクロファージの極性化に影響します。本受容体は、栄養由来リガンドを代謝応答および炎症応答へと接続する重要な結節点であり、肥満に伴うインスリン抵抗性や肝脂肪化の研究に広く関連します。さらに、その発現とシグナル伝達は内分泌調節や消化管生物学の領域でも研究されており、脂肪酸シグナルがホルモン分泌や組織の恒常性を形成します。
GPR120 ダブルニカースプラスミド（r）は、rat 細胞株における 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。