GOLGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432441-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GOLGB1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GOLGB1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GOLGB1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Golgb1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GOLGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432441-NIC | 20 µg | $410.00 |
Golgb1 codifica a proteína de andaime da família das golginas GOLGB1 (giantina), um grande componente de coiled-coil da matriz do complexo de Golgi que contribui para manter a arquitetura da fita (ribbon) do Golgi e para organizar o ancoramento (tethering) de vesículas. A GOLGB1 interage com vias de tráfego que sustentam o transporte do RE para o Golgi, a progressão de cargas dentro do Golgi e a maturação dependente de glicosilação de proteínas secretadas e de membrana. Por meio do seu papel na homeostase do Golgi, Golgb1 influencia processos como deposição de matriz extracelular, expressão de receptores na superfície celular e secreção polarizada, que são centrais para o desenvolvimento e a organização dos tecidos. A perturbação de proteínas estruturais do Golgi, incluindo a giantina, tem sido associada a defeitos na ciliogênese e na biologia do tecido conjuntivo, tornando Golgb1 um alvo útil para estudar mecanismos dependentes de organelos relevantes para fenótipos do desenvolvimento.
GOLGB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Golgb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Golgb1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Golgb1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Golgb1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.