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GnRHR慢病毒激活颗粒(h) | sc-401783-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 **GNRHR** 基因编码促性腺激素释放激素受体(GnRHR),这是一种 A 类 G 蛋白偶联受体(GPCR)。它在垂体促性腺细胞中将下丘脑来源的 GnRH 信号转导出来,从而调控黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的合成与分泌。配体结合后,GnRHR 主要与 Gq/11 偶联并激活 PLCβ,产生 IP3 和 DAG,升高细胞内 Ca2+ 水平,并启动 PKC 依赖性信号传导,进而调节下游 MAPK/ERK 通路。该信号轴通过严格受控的转录程序,协调生殖内分泌的时间节律、类固醇生成的反馈环路以及性腺发育。GNRHR 表达或信号传导的失调与多种生殖内分泌疾病有关,包括低促性腺激素性性腺功能减退以及青春期时间异常,并为研究垂体激素调控机制提供了切入点。
GnRHR 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 GNRHR 表达。
GnRHR 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在GNRHR转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GnRHR表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 GNRHR 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。