Plásmido Doble Nickase (m) GMF-γ: sc-425658-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)GMF-γ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GMF-γ (m) y el plásmido de doble nickasa GMF-γ (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Gmfg. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) GMF-γ | sc-425658-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) GMF-γ | sc-425658-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Gmfg codifica el factor de maduración glial gamma (GMF-γ), una proteína reguladora de la actina enriquecida en linajes hematopoyéticos e inmunitarios que modula la ramificación y desramificación de actina dependiente de Arp2/3 para dar forma a la dinámica de los lamelipodios. Mediante el control de la remodelación del citoesqueleto, GMF-γ influye en la quimiotaxis, la adhesión y los comportamientos fagocíticos, vinculándose con nodos de señalización aguas abajo de las integrinas y de pequeñas GTPasas de la familia Rho que coordinan la migración celular. La actividad alterada de GMF-γ puede perturbar el tráfico de leucocitos y las respuestas inflamatorias, lo que hace de Gmfg un locus útil para estudiar la motilidad de células inmunitarias y las interacciones con el microambiente en modelos murinos. Estos procesos son relevantes para investigaciones mecanísticas sobre la remodelación tisular asociada a la inflamación y el diálogo cruzado entre tumor e inmunidad, sin implicar resultados terapéuticos.
GMF-γ El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Gmfg en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Gmfg. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Gmfg. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Gmfg alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.