glypican-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400256-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- glypican-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase glypican-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase glypican-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPC3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:glypican-3 Anticorpo (F-3): sc-390587
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
glypican-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400256-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
glypican-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400256-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GPC3 humano codifica a glicano-3, um proteoglicano de heparan sulfato ancorado por glicosilfosfatidilinositol (GPI), exposto na superfície celular, onde influencia a disponibilidade de ligantes extracelulares e o engajamento de receptores. A glicano-3 modula a sinalização de fatores de crescimento e vias de morfógenos, incluindo Wnt/β-catenina e Hedgehog, influenciando proliferação, diferenciação e o padrão de organização tecidual durante o desenvolvimento. Por meio de suas cadeias de heparan sulfato, pode regular interações com fatores como ligantes da família FGF e BMPs, afetando a via MAPK e outras saídas de sinalização relacionadas. A expressão desregulada de GPC3 e alterações na sinalização mediada por glicano-3 têm sido associadas a fenótipos oncogênicos e anomalias do desenvolvimento, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos de sinalização celular e biologia tumoral.
glypican-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPC3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPC3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPC3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPC3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.