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Glyoxalase I双切口酶质粒(h) | sc-401914-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glyoxalase I双切口酶质粒(h2) | sc-401914-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **GLO1** 基因编码乙二醛酶 I(glyoxalase I),这是一种细胞质金属酶,可催化谷胱甘肽依赖性的甲基乙二醛解毒过程:将半硫缩醛中间体转化为 **S‑D‑乳酰谷胱甘肽**。该活性是乙二醛酶系统的核心,有助于限制反应性二羰基化合物的累积及其下游晚期糖基化终末产物(AGEs)的形成,从而将 GLO1 与细胞氧化还原平衡、蛋白质稳态以及代谢应激反应联系起来。乙二醛酶 I 功能的扰动可改变与糖酵解相关的羰基应激,并影响涉及糖基化、氧化应激和炎症的信号与损伤通路。GLO1 表达或活性的变化已在糖尿病相关并发症、神经退行性疾病以及肿瘤代谢等研究背景中被用于评估二羰基解毒能力的读出指标。
Glyoxalase I 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GLO1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GLO1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GLO1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GLO1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。