Glycophorin CCRISPR激活质粒(h): sc-405123-ACT

GYPC 编码糖蛋白 C（glycophorin C），它是人类红细胞膜上的主要唾液酸糖蛋白之一，有助于维持红细胞膜的完整性及其表面电荷。糖蛋白 C 通过相互作用参与膜细胞骨架网络的构建，支持跨膜蛋白与下方 spectrin–actin（血影蛋白–肌动蛋白）支架之间的连接，从而影响红细胞在循环过程中的变形能力与稳定性。GYPC 的遗传变异或表达改变与红细胞膜表型及血型抗原多样性相关，因此常在红细胞结构异常疾病以及影响红细胞的宿主–病原体相互作用研究中被关注。作为一种膜锚定糖蛋白，糖蛋白 C 也为研究红系分化程序和膜蛋白转运提供了一个便于操作的模型。

Glycophorin C CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性GYPC的表达。

Glycophorin C CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的GYPC基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于GYPC转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Glycophorin C表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的GYPC位点，并能够研究内源性位点上依赖于Glycophorin C的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在GYPC表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Glycophorin C通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。