Glutathione Peroxidase 7/GPX7CRISPR激活质粒(h): sc-404694-ACT

GPX7 编码谷胱甘肽过氧化物酶 7（glutathione peroxidase 7），这是一种定位于内质网（ER）的巯基过氧化物酶，有助于控制过氧化氢和脂质氢过氧化物水平，从而维持氧化还原稳态。通过限制氧化性蛋白损伤，并支持二硫键形成与蛋白质稳态（proteostasis），GPX7 与内质网应激信号、未折叠蛋白反应（UPR）通路以及更广泛的抗氧化网络发生交互。GPX7 活性改变与由氧化应激驱动的表型相关，这些表型会影响上皮完整性、炎症信号传导以及细胞转化等过程。作为一种氧化还原调控因子，GPX7 常在应激适应、代谢相关功能障碍和肿瘤生物学等模型中被研究，因为在这些背景下活性氧（ROS）会塑造信号与细胞生存。

Glutathione Peroxidase 7/GPX7 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性GPX7的表达。

Glutathione Peroxidase 7/GPX7 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的GPX7基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于GPX7转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Glutathione Peroxidase 7/GPX7表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的GPX7位点，并能够研究内源性位点上依赖于Glutathione Peroxidase 7/GPX7的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在GPX7表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Glutathione Peroxidase 7/GPX7通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。