Glut12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-436139

概要

Slc2a12 はグルコーストランスポーター12（GLUT12）をコードしており、細胞の種類や代謝状態に応じて、基礎的ならびにインスリン応答性のグルコース取り込みを担う促進拡散型のヘキソース輸送体である。マウス組織においてGLUT12は細胞内グルコース恒常性に寄与し、解糖系、グリコーゲン代謝、インスリン／PI3K–AKTシグナル伝達など、エネルギー利用を制御する経路と連携して機能する。Slc2a12 の発現量や細胞内輸送（トラフィッキング）の変化は、インスリン感受性組織における代謝適応と関連づけられており、肥満、インスリン抵抗性、およびそれに伴う心代謝ストレス応答に関係する表現型に影響し得る。Glut12 の機能を解析することは、GLUTファミリー各メンバーが組織間でグルコースフラックスをどのように分担しているか、また輸送体の冗長性が代謝のレジリエンス（頑健性）をどのように形成するかを明らかにする助けとなる。

Glut12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc2a12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc2a12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc2a12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glut12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glut12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc2a12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glut12の機能に不可欠なSlc2a12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc2a12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glut12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGlut12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc2a12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glut12 HDRプラスミド（m）および Glut12 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc2a12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc2a12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。