Glucose Transporter Glut3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423000

Visão geral

Slc2a3 codifica o transportador facilitador de glicose de alta afinidade GLUT3, uma importante via para a captação basal de glicose em células de camundongo com elevada demanda metabólica, incluindo neurônios e populações imunes ativadas. Ao regular a disponibilidade intracelular de glicose, o GLUT3 sustenta o fluxo glicolítico, a produção de ATP e vias biossintéticas que conectam a detecção de nutrientes à sobrevivência e à proliferação celular. Alterações na atividade do GLUT3 podem deslocar o equilíbrio redox e redes de sinalização metabólica como AMPK e mTOR, afetando respostas ao estresse e programas de diferenciação. O transporte de glicose desregulado é frequentemente investigado em contextos de neurobiologia, inflamação e fenótipos de doenças impulsionadas pelo metabolismo, nos quais mudanças na utilização de glicose contribuem para a fisiopatologia.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc2a3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc2a3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc2a3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Glucose Transporter Glut3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc2a3 para a investigação da sinalização de Glucose Transporter Glut3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc2a3 críticos para a função Glucose Transporter Glut3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc2a3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Glucose Transporter Glut3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Glucose Transporter Glut3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc2a3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Glucose Transporter Glut3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Glucose Transporter Glut3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc2a3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc2a3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.