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Glucose Transporter Glut1CRISPR激活质粒(h) | sc-400174-ACT | 20 µg | $397.00 |
SLC2A1 编码葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1)。GLUT1 是一种易化扩散型膜转运蛋白,介导葡萄糖跨质膜的基础摄取,并在不同营养条件下维持糖酵解通量。GLUT1 的活性与能量稳态、缺氧应答相关代谢,以及碳源进入生物合成通路(如用于氧化还原调控和核苷酸生成的磷酸戊糖途径)密切相关。SLC2A1 的调控与多种信号与转录程序相交汇,包括 HIF‑1 依赖性应答以及细胞压力下更广泛的代谢重编程。GLUT1 表达及葡萄糖利用的改变在代谢功能障碍和增殖性重塑等背景中被广泛研究,为探究依赖营养物质转运的表型提供了机制层面的切入点。
Glucose Transporter Glut1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SLC2A1的表达。
Glucose Transporter Glut1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SLC2A1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SLC2A1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Glucose Transporter Glut1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SLC2A1位点,并能够研究内源性位点上依赖于Glucose Transporter Glut1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SLC2A1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Glucose Transporter Glut1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。